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    抗体制备信息采集表

    时间：2020-12-14 10:26:02 来源：蒲公英阅读网 本文已影响人 蒲公英阅读网手机站

    相关热词搜索：抗体 制备 信息采集

    　抗体制备信息采集表

    　请尽量详细、准确的填写下表，充分的沟通将有助于我们为您提供更好、更快的服务，谢谢！

    　黄色标注为必填项。请将填好的表格发至邮箱：，技术支持电话：。

    　双击复选框可进行标记。也可复制这个符号：

    　 表示选中

    　表示不选。

    　客户信息 联系人：

    　电话：

    　邮箱：

    　负责人：

    　电话：

    　邮箱：

    　办事处（销售员）：

    　单位（开票抬头）：

    　地址（收货地址）：

    　抗原信息

    　抗原蛋白信息（ 名称/NCBI 编 编号，物种来源…）

    　 是否提供免疫原

    　是（如选择“是”，请在下方选择你现有免疫原的制备方法，并在详细信息处填写免疫原的纯度、浓度、质量等信息。不需要填写“ 附表一” 。）

    　否（如选择“否”，请在“ 附表一”填写您能够提供的抗原信息：如，基因序列，cDNA 模版，原核表达载体，酶切位点，标签….）

    　免疫原制备方法：

    　原核表达蛋白（一般要求：3-5 mg，纯度＞85%，浓度＞0.5 mg/ml，透析到 PBS 或 Tris缓冲液）

    　多肽合成（一般要求：20 mg，其中 10mg裸肽、10 mg 偶联 KLH）

    　其他（真核表达蛋白、细菌、病毒…）

    　抗原的 详细信息：

    　抗体定制类型

    　单克隆抗体（小鼠来源）

    　单克隆抗体（兔来源）

    　多克隆抗体（一般是兔来源，其他来源需要咨询）

    　抗体验收的标准（可以单选或多选）

    　ELISA 验证（效价检测：＞1：64000）

    　的 免疫原的 Western Blot 证 验证（免疫原为蛋白）的 或免疫原的 dot blot 证 验证（免疫原为多肽）

    　备注：抗体验收的标准不包括“ 能检测天然蛋白”。

    　附表一：原核蛋白表达纯化需求登记表 请尽量详细、准确的填写下表，充分的沟通将有助于我们为您提供更好、更快的服务，谢谢！

    　1. 基因及蛋白信息：

    　基因名称

    　NCBI

    　ID 号

    　物种来源

    　目标基因序列

    　目的蛋白的氨基酸序列

    　质粒构建 客户提供表达载体（为保证实验顺利进行，请提供重组载体信息图谱及测序报告等全部信息）

    　生工构建表达载体：直接进行目的基因的全基因合成并构建表达载体。。

    　生工构建表达载体：进行密码子优化后再进行目的基因的全基因合成并构建表达载体。

    　其他方式：（

    　）。

    　若客户提供构建好的表达载体 （请邮件提供质粒信息、测序文件）

    　宿主菌名称：（

    　 ）

    　菌液体积：（

    　 ）

    　表达载体：（

    　 ）

    　目的基因两端插入的酶切位点和位置：（

    　 ）

    　培养条件：（

    　 ）

    　保存温度：（

    　 ）

    　目的蛋白性质 温度稳定范围：（

    　）

    　PH 稳定范围：（

    　）

    　PI 值：（

    　 ）

    　分子量：（

    　 ）

    　蛋白定位（细胞浆，胞核，胞膜或者分泌蛋白：（

    　）

    　是否存在翻译后修饰：（

    　）

    　2. 对最终目的蛋白的要求：

    　目标蛋白能否与标签进行融合表达 能否与 HIS、GST 等标签进行融合表达

    　不需要

    　可以融合表达（请标明何种标签

    　 ）标签位置

    　5’端

    　3’端 最终蛋白是否需要切除融合标签（如果标签不影响将来的抗体制备，建议尽量避免酶切标签）

    　需要

    　不需要

    　如果蛋白需要切除标签，则标签与目的蛋白之间的蛋白酶识别位点有无要求：

    　烟草蚀纹病毒蛋白酶/TEV

    　肠激酶/EK

    　凝血酶/Thrombin

    　其他蛋白酶 蛋白需求量 需要纯化好的目标蛋白

    　mg（如果蛋白需要做抗体，则蛋白量大于 5 毫克）

    　蛋白纯度要求

    　纯度大于 80%

    　 纯度大于 85%

    　 纯度大于 90%（SDS-PAGE 电泳鉴定蛋白纯度）（如果蛋白需要做抗体，则蛋白纯度至少大于 85%）

    　蛋白浓度要求 默认≥0.3mg/ml,如果需要更高浓度，费用和周期相应增加 蛋白是否去除内毒素

    　需要

    　不需要（如果蛋白需要做抗体，则一般不需要去除内毒素）

    　验收标准 最终纯化蛋白的验收标准为：1）SDS-PAGE 显示纯化蛋白满足理论分子量及纯度要求；2）必要时进行 WB 检测

    　Buffer 及发货要求

    　其他缓冲体系，请注明缓冲液成分（

    　）

    　冻干（费用和周期相应增加）；

    　默认 50mmol/L Tris, 300 mmol/L NaCl, pH8.0 缓冲体系 备注：如果对缓冲液有特殊要求，在此标出（

    　 ）

    　如其他特殊要求请注明 下单后不作更改

    　 3. 您是否尝试过自己表达、纯化目标蛋白，结果如何？

    　从未进行过表达尝试

    　进行过表达实验：

    　未检测到表达, 可能原因是：（

    　）

    　有表达，目标蛋白表达量占全菌蛋白的百分比为：

    　%。

    　目标蛋白存在于

    　上清中

    　 沉淀中

    　 上清沉淀均表达 （请附蛋白表达的电泳图谱，注明分子量。）

    　曾用过的表达条件：（

    　 ）

    　如果形成包涵体，是否做过复性：

    　是

    　复性条件是

    　 结果如何：

    　 否 尝试过纯化方法或文献中的方法（请附文件）：

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