生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定
生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 本文关键词:可溶性,蛋白质,还原,脂肪,组中
生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 本文简介:实验一生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、教材分析:1.该实验是高中阶段生物课程的第一个实验。从此以后生物化学方面的内容增加。本实验的操作技能的学习为以后该类型实验打好基础,一定要强调规范化操作方法。2.低高倍镜的使用、徒手切片、临时装片等技能,学生经初三、高一两年的搁置,已显生疏。实验时教
生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 本文内容:
实验一
生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
一、教材分析:
1.该实验是高中阶段生物课程的第一个实验。从此以后生物化学方面的内容增加。本实验的操作技能的学习为以后该类型实验打好基础,一定要强调规范化操作方法。
2.低高倍镜的使用、徒手切片、临时装片等技能,学生经初三、高一两年的搁置,已显生疏。实验时教师可考虑予复习,或通过演示提醒学生,注意规范操作要领。
3.本实验难度并不大,但由于内容较多、实验时间长,必须作周密安排才能完成。如实验中教师应做好学生的分工合作可缩短实验时间。同时又能培养学生的合作精神。
二、教学目标:
知识目标:阐明实验原理—颜色反应,识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。
能力目标:培养学生主动获取知识,应用知识分析现象,归纳总结的能力,培养学生实际操作的能力及从现象出发探求事物本质的能力。
情感与价值目标:通过亲手实验体验科学家严谨治学的科学态度,培养实事求是的世界观。
三、教学重点:
掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
四、教学难点:
实验内容较多,实验时间长,必须周密安排,才能按时完成。
学生要分工合作、教师指导演示。
五、材料用具:
实验材料:葡萄糖液、苹果组织液,植物油滴、浸泡过的花生种子或新鲜的花生种子,鸡蛋蛋白稀释液、黄豆组织液。
仪器:徒手切片刀,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,载玻片,盖玻
片,毛笔,吸水纸,显微镜。
试剂:斐林试剂,苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液,双缩脲试剂A、双缩脲试剂B,体积分数为50%的酒精溶液,蒸馏水。
六、教学过程:
(一)实验原理讲解:
1.可溶性还原糖鉴定原理
生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有,为非还原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。
斐林试剂为一定浓度的氢氧化钠和硫酸铜配制而成的淡蓝色Cu(OH)2沉淀的悬浊液,葡萄糖溶液在加入斐林试剂后,在加热条件下还原为砖红色的沉淀,而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反应式为:
CH2OH—(CHOHH)4—CHO
+
2Cu(OH)2
→
CH2OH—(CHOH)4—COOH
+
Cu2O
+
2H2O
用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为;浅蓝色→棕色→砖红色沉淀
2.脂肪鉴定原理
苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ为一种橙黄色脂肪染色剂。苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色,苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。
3.蛋白质鉴定原理
将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。
(尿素)
(尿素)
(双缩脲)
双缩脲在碱性环境中能和硫酸铜结合成红紫色的络化物。蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似,因此,蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应:
—CO—NH—(类似双缩尿H2NOC—NH—CONH2结构)酸性条件下与Cu2+作用形成紫色络合物——双缩脲反应
(二)、操作指导:
1.实验成功的关键在于实验材料的选择。
“生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验,实际上是三个独立的实验。在实验中,如注意以下问题,则效果会很好。
⑴.在做可溶性还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,最好是白色或近于白色的植物组织,这样可以避免材料自身颜色对实验变化颜色的掩盖。经实验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。
⑵.在做脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选用富含脂肪的种子,且徒手切片要成功,要求实验技能较高,不妨改成刮取花生子叶泥制作临时装片,易做,效果又好。
⑶.在做糖和蛋白质的实验时,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋,鉴定之前需要留出一部分样液,以便与鉴定后的样液的颜色做比较,这样可增强说服力。
2.注意事项:
(1)斐林试剂很不稳定,故应将组成斐林试剂的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)分别配制、储存,使用时,再临时配制,将4~5滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用。切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。
(2)
鉴定可溶性还原糖,加热试管时,应该用试管夹夹住试管上部,放入盛开水的大烧杯加热;注意试管底部不接触烧杯底部,同时试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾,可以提起试管夹,使试管与沸水接触面减少,以免溶液溢出。
(3)
在鉴定脂肪的实验中,若用花生种子作实验材料,必须提前浸泡3~4小时,浸泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,则组织太软,切下的薄片不易成形,切片要尽可能的薄。
(4)
染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色,染色和洗浮色时间不宜过长(否则酒精将脂肪溶解影响实验效果),观察时找最薄处最好只有1—2层细胞。
(5)在蛋白质的鉴定实验中,若用蛋白质作实验材料,必须稀释,如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗刷干净。
⑹双缩脲试剂的使用,应先加试剂A(0.1g/mL的NaOH溶液),造成碱性的反应环境,再加试剂B(0.01g/mL的CuSO4溶液)。
(三)、方法步骤
教师把事先配制好已知待测样品,葡萄糖液、植物油滴、鸡蛋蛋白稀释液让学生按要求加入相应试剂,观察颜色变化。砖红色、橘黄色、紫色。然后分别鉴定生物组织中的三种物质。
1、
可溶性还原糖的鉴定
取材:含糖量较高的白色或近于白色的组织(排除色素对显色的干扰)约5克。
制备组织样液:加黄砂(充分研磨)、5ml水(溶解可溶性糖),研磨、过滤
取2ml组织样液加入试管中
显色反应
加2ml刚配好的斐林试剂(用前混匀,加入溶液时呈蓝色)
[隔水加热,煮沸2
min]
观察结果:溶液中出现砖红色沉淀
2、脂肪的鉴定
取材:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片
选取最薄的薄片移至载玻片中央
染色:滴加苏丹Ⅲ
(苏丹Ⅳ)染液2—3滴
制片
洗去浮色:用吸水纸吸去花生子叶薄片周围的染液,滴加体积分数为
50%的酒精溶液1—2滴(溶解有机物)
用吸水纸吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片
显微镜观察:先在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处,移至视野中央,再用高
倍镜观察,可看到已着色的圆形小颗粒(注意指导学生使用高倍显
微镜的方法)
结果:有橘黄色(或红色)的脂肪微粒
3、蛋白质的鉴定
制备组织样液:黄豆组织样液(或鸡蛋白稀液)
[黄豆浸泡
→去皮→切片→研磨→过滤→滤液]
取组织样液2ml加入试管
显色反应
加入双缩尿试剂A
[0.1g/mLNaOH]
2ml
[创设碱性条件]
摇荡均匀
再加入双缩尿试剂B
[0.1g/mLCuSO4]
3—4滴
[提供Cu2+]摇荡均匀
观察:蛋白质与双缩脲试剂发生颜色反应,溶液变成紫色
(四)、结论与讨论
1.结论:上述实验证明苹果果肉中、花生种子中、黄豆组织中各存在什么样物质?
答:可溶性还原糖、脂肪、蛋白质。
2.讨论:为什么根据某些化学反应能够使生物组织中的有关有机物产生固定的颜色反应可以鉴定生物组织有糖、脂肪、蛋白质的存在?
因为某些化学试剂与生物组织中的化合物发生一定的化学反应后,可产生新的化合物,而这种化合物是有固定的颜色的。因此,根据待检测物与某些化学试剂反应的固有颜色,如砖红色、橘黄色、紫色等。可以鉴定生物组织中存在有糖、脂肪、蛋白质。
3.
做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的实验材料。清根据下表所列各种材料回答问题:
各种可供实验的材料
梨
黄桃
胡萝卜
黄豆
花生种子
小麦种子
①其中适合于鉴定糖的是
,理由是
,你打算用什么试剂鉴定?
。
②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪,这是因为
,你打算用什么试剂鉴定?
③适合于鉴定蛋白质的是
,理由是
,鉴定所用的试剂是
。
答案:①梨
梨的组织细胞颜色为白色,并且糖含量较高
斐林试剂或班氏试剂。②小麦种子的脂肪含量不如花生种子高,也不容易做切片
用苏Ⅲ试剂鉴定。③黄豆和花生
蛋白质含量高
双缩脲试剂。
(五)、实验效果检查与评定
银幕显示检测题
1、某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料,原因是:
答案:这些叶子的颜色较深,对还原性糖与斐林试剂的颜色反应起遮蔽作用
2、下列哪组试剂在使用过程中,必须加热:
A.斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中
B.苏丹Ⅲ染液在鉴定动物组织中的脂肪时
C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时
D.碘化钾溶液鉴定淀粉时
3、某学生在鉴定脂肪的实验中,在显微镜下观察花生子叶切片,当转动细调节器时,有一部分细胞看的清楚,另一部分较模糊,这是由于:
A.反光镜未调节好
B.标本切的厚薄不均
C.细调节器未调节好
D.显微镜物镜损坏
4、苏丹Ⅲ溶液的配制的方法是:
称取0.1g苏丹Ⅲ干粉,溶于100mL酒精的体积分数为95%溶液中,待全部溶解后再使用,为什么用酒精而不用蒸馏水?
答案:苏丹Ⅲ染液易溶解于酒精中
,不易溶解于水。
5、鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是
A.先加A液,混合后再加B液摇匀观察
B.先加B液,混合后再加A液摇匀观察
C.A、B混合后加入,摇匀观察
D.A、B液同时加入样液,摇匀后观察
6、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择中,错误的是:
A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可用于进行可溶性还原糖的鉴定
B、花生种子含脂肪多且子叶肥厚,适用于脂肪鉴定
C、大豆种子蛋白质含量高,可用于蛋白质的鉴定
D、
鸡蛋清含蛋白质多,是蛋白质鉴定的理想材料
(六)、布置作业
1.将可溶性糖、脂肪、蛋白质鉴定原理及结沦填写在《实验报告册》上。
2.斐林试剂主要用来鉴定可溶性还原糖,其主要成分为NaOH和CuSO4的混合液,用你已有的化学知识判断,这两种物质混合以后能发生什么反应?
,并且请解释为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久:
。通过查有关资料或请教化学老师:斐林试剂中的什么成分在加热条件下与还原糖发生了什么化学反应?砖红色的沉淀物是什么?
。
答案:生成了蓝色的Cu(OH)2沉淀的悬浊液
时间一长,Cu(OH)2沉淀在溶液底部无法发生反应
发生了氧化还原反应,生成了砖红色的Cu2O沉淀和某种糖的有机酸
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主题教育调查研究工作方案1根据省、市、县开展“不忘初心、牢记使命”主题教育工
【寓言童话】 日期:2021-03-19
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惊悚鬼故事50字 令人惊悚的故事
这些惊悚故事在短短的篇幅和时间之内让您感受到故事里传达出来的恐怖感,令你感到害怕。下面就是小编给大家整理的令人惊悚的故事,希望对你有用! 令人惊悚的故事篇1:学校...
【寓言童话】 日期:2019-05-13
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读《李光耀观天下》有感_李光耀观天下txt在线读
务实与真诚 ——读《李光耀观天下》有感 原创:雁过留声ly 购于北大,在出差的飞机和高铁上读完,这本《李光耀观天下》给予我很多启示。严格地说,这本书没有详
【寓言童话】 日期:2019-05-05
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【古代男生漫画图片大全】男生漫画头像
漫画和动画组成了动漫产业的两大支柱。然而,与动画相比,漫画在业界和学界皆相对冷清。小编整理了古代男生漫画,欢迎阅读! 古代男生漫画图片展示 古代男生漫画图片1 ...
【寓言童话】 日期:2019-05-27
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北京最好吃的自助餐厅 北京高档自助餐排名
自助餐简直就是拯救大胃王的最佳饮食!没有之一!世界上没有什么事情是吃一顿自助餐解决不了的,如果有,那就吃两顿!下面小编给大家推荐北京几家好吃的自助餐。 北京最好吃的...
【寓言童话】 日期:2020-02-25
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学生高考动员演讲稿
学生高考动员演讲稿3篇高考动员演讲稿11 老师们、同学们: 大家下午好!漫漫高考长征路已经进入尾声了
【百家讲坛】 日期:2021-09-22
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企业安全演讲稿2021
最新企业安全的演讲稿5篇 演讲稿是作为在特定的情境中供口语表达使用的文稿。在充满活力,日益开放的今天
【百家讲坛】 日期:2021-09-22
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XX镇扶贫项目实施专项整治工作总结_1
XX镇扶贫项目实施专项整治工作总结 为深入贯彻精准扶贫精准脱贫基本方略,认真落实党中央、国务院,省委
【百家讲坛】 日期:2021-09-22
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对乡镇领导班子干部成员批评意见例文
对乡镇领导班子干部成员的批评看法范文 一、对党委书记XXX同志的批评看法〔3条〕 1、与干部交流偏少
【百家讲坛】 日期:2021-09-22
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群英乡扶贫资金项目芬坡村祖埇村生产道路硬化工程绩效自评报告
群英乡扶贫资金项目((芬坡村祖埇村生产道路硬化工程))绩效自评报告 一、基本情况(一)群英乡扶贫资金
【百家讲坛】 日期:2021-09-22
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党委书记警示教育大会上讲话2021汇编
党委书记在警示教育大会上的讲话55篇汇编 党委书记在警示教育大会上的讲话(一) 同志们: 根据省州委
【百家讲坛】 日期:2021-09-22
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对于2021年召开巡视整改专题民主生活会对照检查材料
关于12021年召开巡视整改专题民主生活会对照检查材料 按照中央巡视组要求和省、市、区委统一部署,区
【百家讲坛】 日期:2021-08-14
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消防安全知识培训试题.doc
消防安全知识培训试题姓名: 部门班组: 成绩: 一:填空题,每空4分,共44分。 1、灭火剂是通过隔
【百家讲坛】 日期:2021-08-14
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涉疫重点人员“五包一”居家隔离医学观察工作流程
涉疫重点人员“五包一”居家隔离医学观察工作流程 目前,全球疫情仍处于大流行状
【百家讲坛】 日期:2021-08-14
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疫情防控致全体师生员工及家长一封信
疫情防控致全体师生员工及家长的一封信 各位师生员工及全体家长朋友: 暑假已至,近期我省部分地方发现确
【百家讲坛】 日期:2021-08-14